Virulence of entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Steinernematidae and Heterorhabditidae) for the control of Diabrotica speciosa germar (coleoptera: chrysomelidae) / Virulência de nematoides entomopatogênicos (Rhabditida: Steinernematidae e Heterorhabditidae) para o controle de Diabrotica speciosa germar (coleoptera: chrysomelidae)

Entomopathogenic nematodes (EPNs) are used in biological control of soil insects and show promise in the control of D. speciosa. The objective of this work was to evaluate the potential of native and exotic entomopathogenic nematode isolates in the control of D. speciosa under laboratory and greenhouse conditions. Results showed that all of EPNs caused larval mortality. The most virulent were Heterorhabditis sp. RSC01 (94 percent), Steinernema glaseri (84 percent), Heterorhabditis sp. JPM04 (82 percent) and Heterorhabditis amazonensis RSC05 (78 percent). There was no effect of the Heterorhabditis sp. RSC01 and S. glaseri isolates on eggs. The maximum mortality of D. speciosa larvae by Heterorhabditis sp. RSC01 was observed at a concentration of 300 IJ/ insect, while by S. glaseri observed the highest mortality at the concentration of 200 IJ/ insect. The Heterorhabditis sp. RSC01 isolate caused over 80 percent pupal mortality at a concentration of 250 IJ/insect. The virulence of Heterorhabditis sp. RSC01 and S. glaseri was affected by temperature. The Heterorhabditis sp. RSC01 isolate caused reduction in larva survival under greenhouse conditions at all of the tested concentrations and there was no difference in mortality among different concentrations of infectid juveniles.

Os nematóides entomopatogênicos são utilizados no controle biológico de pragas de solo, e são promissores para o controle de D. speciosa. Neste trabalho, objetivou-se avaliar o potencial de espécies nativas e exóticas de isolados de nematóides entomopatogênicos para o controle de D. speciosa, em condições de laboratório e de casa de vegetação. Verificou-se que todos os nematóides causaram mortalidade larval. Os mais virulentos foram Heterorhabditis sp. RSC01 (94 por cento), Steinernema glaseri (84 por cento), Heterorhabditis sp. JPM04 (82 por cento) e Heterorhabditis amazonensis RSC05 (78 por cento). Não houve efeito dos isolados Heterorhabditis sp. RSC01 e S. glaseri em ovos. A mortalidade máxima de larvas de D. speciosa por Heterorhabditis sp. RSC01 foi observada na concentração de 300 JI / inseto, enquanto para S. glaseri a maior mortalidade foi obervada na concentração de 200 JI/ inseto. O isolado Heterorhabditis sp. RSC01 causou mais de 80 por cento de mortalidade de pupas na concentração de 250 IJ/ inseto. A virulência de Heterorhabditis sp. RSC01 e S. glaseri foi afetada pela temperatura. O isolado Heterorhabditis sp. RSC01 causou redução na sobrevivência da larvas em casa de vegetação em todas as concentrações de juvenis infectantes testadas e não houve diferença na mortalidade entre os diferentes tratamentos.

Evaluation of entomopathogenic nematodes under laboratory and greenhouses conditions for the control of Spodoptera frugiperda / Avaliação de nematoides entomopatogênicos em condições de laboratório e casa-de-vegetação visando ao controle de Spodoptera frugiperda

The increased corn planting grown in the late season crop and the use of a notillage planting system benefits the development of Spodoptera frugiperda, the main pest of corn crop. Thus, this study aimed to select entomopathogenic nematodes based on the mortality of S. frugiperda, and to adjust the nematode concentrations in the laboratory and evaluate the action of these organisms in greenhouse conditions. Seventeen nematode populations were tested at concentrations of 100, 250, and 500 infective juveniles (IJ)/larvae. The obtained data were submitted to the polynomial regression test. In the greenhouse, corn sowing was performed in plastic buckets with soil, corn straw, and water. After 7 days, Steinernema arenarium or Heterorhabditis sp. RSC02, and the larvae were added (40 larvae, one larvae/repetition). The data were submitted to the variance analysis and the Scott-Knott test (P<0.05). In the laboratory, tests with S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused mortality of 85 and 90 percent, respectively, being selected for the concentrations test. Concentrations of 150, 200, 250, 300, and 350IJ larvae-1 were tested. At a concentration of 200IJ larvae-1, S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused 100 and 97.6 percent mortality in laboratory, respectively, and in the greenhouse caused 77.5 and 87.5 percent mortality, respectively, when compared to the control (7.5 percent).

O aumento no plantio do milho "safrinha" e o uso do sistema de plantio direto favorecem o desenvolvimento de Spodoptera frugiperda, principal praga da cultura. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram selecionar nematoides entomopatogênicos, de acordo com a mortalidade causada sobre S. frugiperda, adequar as concentrações em laboratório e avaliar a ação desses organismos em condições de casa-de-vegetação. Foram testadas 17 populações de nematoides nas concentrações de 100, 250 e 500 juvenis infectantes (JI) lagarta-1. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de regressão polinomial. Em casa-de-vegetação, a semeadura do milho foi realizada em vasos de plástico contendo solo, palhada de milho e água. Após sete dias, foram adicionados Steinernema arenarium ou Heterorhabditis sp. RSC02 e as lagartas (40 lagartas, uma lagarta/repetição). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e ao teste de médias Scott-Knott (P<0,05). Nos testes de laboratório, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram mortalidade de 85 e 90 por cento, respectivamente, sendo selecionados para o teste de concentrações. Foram testadas as concentrações de 150, 200, 250, 300 e 350JI lagarta-1. Na concentração de 200JI lagarta-1, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram 100 e 97,6 por cento de mortalidade, respectivamente, e em casa-de-vegetação causaram 77,5 e 87,5 por cento, respectivamente, diferindo da testemunha (7,5 por cento).

Influence of soil temperature and moisture on the infectivity of entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Heterorhabditidae, Steinernematidae) against larvae of Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae)

The Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata (Wiedemann), is considered one of the main pests that affect fruit production in the world. This insect spends part of its life cycle in the soil, making it a target for entomopathogenic nematodes. This work aimed at evaluating the influence of soil temperature and moisture on the infectivity of Heterorhabditis sp. RSC01 and Steinernema carpocapsae ALL to third-instars of C. capitata, and to compare the efficiency of these isolates at five different soil temperatures (19, 22, 25, 28, and 31°C) and three levels of relative soil moisture (100, 75, and 50 percent of field capacity). Ten C. capitata larvae were transferred to plastic jars (12 cm × 6 cm) containing 100 g soil, followed by the application of an aqueous suspension containing 125 infective juveniles (IJ)/cm². In the control treatment, 3 ml of distilled water was applied. Mortality evaluations were made five days later and were confirmed by observations of the characteristic symptoms and cadaver dissection. The infectivity was directly proportional to temperature increase, with maximum percent mortality of 86.7 percent and 80.0 percent for S. carpocapsae and Heterorhabditis sp., respectively, at 31°C. At 25°C, the highest mortality for both species was obtained at 75 percent of field capacity (96.7 percent and 26.7 percent for S. carpocapsae and Heterorhabditis sp., respectively).

Testes em condições para o controle de Dysmicoccus texensis (Tinsley) (Hemiptera, Pseudococcidae) em cafeeiro com nematóides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis(Rhabditida, Heterorhabditidae) / Tests for the control of coffee root mealybug Dysmicoccus texensis (Tinsley) (Hemiptera, Pseudococcidae) with Heterorhabditis (Rhabditida, Heterorhabditidae)

Os nematóides entomopatogênicos (NEPs) apresentam potencial para o controle biológico de pragas e têm sido usados com sucesso, em vários países, no controle de pragas de solo e de ambientes crípticos, como a cochonilha-da-raiz-do-cafeeiro Dysmicoccus texensis (Tinsley). Testes de laboratório demonstram que estes agentes apresentam alta virulência sobre este inseto, no entanto, são necessários testes que avaliem a eficiência dos NEPs em condições de casa-de-vegetação e campo, sendo este o objetivo do presente trabalho. O experimento em condição de casa-de-vegetação para o controle da cochonilha foi realizado em vasos infestados, usando dois isolados do nematóide e dois métodos de aplicação (cadáver infectado e suspensão aquosa), conduzido em delineamento inteiramente casualisado com cinco repetições. O experimento em condições de campo foi conduzido em blocos casualisados (6 blocos), para avaliar a eficiência de dois isolados heterorhabditídeos no controle da cochonilha-da-raiz-do-cafeeiro. Os resultados mostraram que, em casa-de-vegetação, o método de suspensão aquosa apresentou melhores resultados para os dois isolados, sendo que JPM3 aplicado em suspensão aquosa foi o melhor tratamento, apresentando eficiência de controle de 70 por cento. No experimento de campo, apenas o tratamento com o inseticida Actara 250 WG (thiamethoxam), usado como padrão de comparação, e JPM3, aplicado em suspensão aquosa, diferiram da testemunha, apresentando 81 e 65 por cento de eficiência de controle, respectivamente.

Entomopathogenic nematodes (EPNs) have potential for biological pest control and have been successfully used in several countries in soil and cryptic pests control, as for example the coffee root mealybug Dysmicoccus texensis (Tinsley). Laboratory tests demonstrated that these agents are highly virulent to the insect, but semi-field and field tests are needed to determine their efficiency. Greenhouse tests were made in infested pots with two isolates and two application methods dead insect bodies and aqueous suspension in a complete randomized design with five replicates. Field tests were made in randomized plots (six plots) to evaluate six isolates of Heterorhabditis on coffee root for mealybug control. Greenhouse results demonstrate that aqueous suspension was more efficient for the two isolates, with 70 percent control efficiency for JPM3. In field experiments, treatments with aqueous suspensions of insecticide Actara 250 WG (thiamethoxam), used for comparison, and JPM3 were the only ones statistically different from control, with 81 and 65 percent control efficiency, respectively.

Patogenicidade de fungos hifomicetos aos pulgões Aphis gossypii Glover e Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae) / Pathogenicity of hyphomycet fungi to aphids Aphis gossypii Glover and Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae)

As espécies de pulgões Aphis gossypii e Myzus persicae são cosmopolitas e polífagas, causando prejuízos em plantas cultivadas. Os efeitos dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (isolado IBCB 66), Metarhizium anisopliae (isolado IBCB 121), Paecilomyces fumosoroseus (isolado IBCB 141) e Lecanicillium (= Verticillium) lecanii (isolado JAB 02) foram avaliados sobre ninfas de 3° ínstar de A. gossypii e M. persicae. O experimento foi realizado a 25 ± 1°C, 70 ± 10 por cento de UR e fotofase de 12h. Os pulgões foram colocados em disco foliar (algodão/pimentão) com uma camada de 1 cm de espessura de ágar-água, em placas de Petri. A inoculação de 1 ml de suspensões fúngicas foi realizada com concentrações que variaram de 1,0 x 10(6) a 1,0 x 10(8) conídios/ml de cada fungo. No tratamento testemunha foi adicionado 1 ml de água esterilizada sobre os discos foliares. A mortalidade dos pulgões foi avaliada diariamente. B. bassiana e M. anisopliae causaram mortalidade de 100 por cento no 7° dia após a inoculação, para ambas espécies. L. lecanii foi o fungo que provocou mortalidade mais tardia nos pulgões e M. persicae foi mais suscetível aos fungos que A. gossypii.

The aphids Aphis gossypii and Myzus persicae are cosmopolitan, poliphagous and damage cultivated plants. The effects of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (isolate IBCB 66), Metarhizium anisopliae (isolate IBCB 121), Paecilomyces fumosoroseus (isolate IBCB 141) and Lecanicillium (= Verticillium) lecanii (isolate JAB 02) on third instar nymphs of A. gossypii and M. persicae were evaluated in the laboratory at 25°C, 70 ± 10 percent RH and 12h photophase. The aphids were transferred to petri dishes with a foliar disk (cotton or pepper) with a layer of 1 cm tick of agar-water. The fungi were applied in a suspension containing 1.0 x 106 to 1.0 x 108 conidia/ml. In the control treatment 1 ml of sterilized water was added to the foliar disks. The mortality of aphids was evaluated daily. B. bassiana and M. anisopliae caused 100 percent mortality at the seventh day after inoculation, for both species. L. lecanii was the fungus that provided mortality later in the aphids and M. persicae was more susceptible to both fungi than A. gossypii.

Compatibilidade de Beauveria bassiana com agrotóxicos visando o controle da cochonilha-da-raiz-do-cafeeiro Dysmicoccus texensis Tinsley (Hemiptera: Pseudococcidae) / Compatibility of Beauveria bassiana with chemical pesticides for the control of the coffee root mealybug Dysmicoccus texensis Tinsley (Hemiptera: Pseudococcidae)

Várias são as substâncias químicas usadas no controle de insetos, doenças e plantas invasoras, porém muitos desses produtos são tóxicos ao homem e aos animais, além de reduzir o potencial de controle de predadores, parasitóides e entomopatógenos. O controle integrado utilizando agrotóxicos seletivos e fungos entomopatogênicos é uma estratégia viável, porém alguns destes produtos podem atuar negativamente sobre estes microrganismos, reduzindo crescimento vegetativo, esporulação e viabilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de agrotóxicos aplicados na cultura do cafeeiro, sobre o fungo Beauveria bassiana (isolado UEL 114), visando o controle da cochonilha-da-raiz-do-cafeeiro. Uma suspensão de 1 x 10(7) conídios viáveis/ml do fungo foi adicionada a soluções dos produtos nas concentrações recomendadas. Após 1h, foi feito o plaqueamento em meio BDA, e a quantificação dos conídios germinados após 20h. O crescimento vegetativo e a esporulação foram avaliados oito dias após a inoculação do fungo em meio BDA contendo os produtos nas concentrações recomendadas, e mantido em câmara B.O.D. à temperatura de 25 ± 1°C, fotofase de 12 h e umidade relativa de 70 ± 10 por cento. Foram medidos o diâmetro médio das colônias e quantificados os conídios produzidos em câmara de Neubauer. Azafenidine, quintozene, simazine + ametrine, 2,4-D, acetoclor e oxifluorfem afetaram a germinação dos conídios de B. bassiana. Tiametoxam, imidaclopride, carbofuram e pencicurom foram compatíveis; ao passo que glifosato, dimetilurea, azafenidine, quintozene, simazine + ametrine, 2,4-D, acetoclor e oxifluorfem reduziram significativamente o crescimento vegetativo e esporulação do isolado UEL 114 de B. bassiana.

Several chemical substances are used to control insects, diseases and weeds, however many of these products are toxic to mankind and the animals, besides reducing the potential of pest control by predators, parasitoids and pathogens. The integrated control using selective chemical pesticides and entomopathogenic fungi is a viable strategy, however some of these products can impact these microorganisms, reducing vegetative growth, viability and sporulation. The objectives of this work were to evaluate the effect of chemical pesticides used in the coffee crop on the entomopatogenic fungus Beauveria bassiana (isolate UEL 114), for the control of the cofee root mealybug. A fungal suspension of 1 x 10(7) viable conidia/ml was added to solutions of the products at the recommended concentrations. After 1h, conidia were inoculated onto PDA medium, and quantification of germinated conidia assessed after 20h. The vegetative growth and sporulation were appraised eight days after the fungus inoculation onto PDA medium containing the products at recommended concentrations and maintained at the temperature of 25 ± 1°C, 12h photofase and 70 ± 10 percent relative humidity. The mean diameter of the colonies was measured and conidial production quantified in a Neubauer chamber. Azafenidyne, Quintozene, Symazine + Ametryne, 2,4-D, Acetochlor and Oxyfluorfen affected the conidial germination. Thiamethoxan, Imidacloprid, Carbofuran and Pencycuron were compatible; whereas Glyphosate, Dimetilurea, Azafenidine, Quintozene, Symazine + Ametryne, 2,4-D, Acetochlor and Oxyfluorfen significantly impacted vegetative growth and sporulation of B. bassiana UEL 114.

Efeito de produtos fitossanitários químicos utilizados em alface e crisântemo sobre fungos entomopatogênicos / Effect of chemical products used in lettuce and chrysanthemum on entomopathogenic fungi

The effect of eight fungicides and twelve insecticides used in lettuce and chrysanthemum crops, was evaluated on the fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok., Paecilomyces fumosoroseus (Wise) (Holm ex SF Gray) and Verticillium lecanii (Zimmerman) through in vitro tests. The products were added to petri dishes containing culture medium (PDA), according to the concentrations recommended for application in field. After the inoculation of the fungi, the plates were incubate at 25±1°C, 12h fotophase and 70±10 percent relative humidity. The mean diameter of colonies and the number of conidia produced after a variable period of incubation for each studied fungus were evaluated. The insecticides thiametoxan and imidacloprid were compatible with all the fungi studied. On the other hand, cuprous oxide, iprodione, methyl parathion, tebuconazol, metalaxil, mancozeb, folpet, fenpropathrin and tetraconazol inhibited the growth of the fungi, being classified as toxicant or very toxicant products to the entomopathogens.

O efeito de oito fungicidas e doze inseticidas, utilizados nas culturas de alface e crisântemo, foi avaliado in vitro sobre os fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok., Paecilomyces fumosoroseus (Wise) (Holm ex SF Gray) e Verticillium lecanii (Zimmerman). Os produtos foram colocados em placas de Petri contendo meio de cultura (BDA), nas concentrações recomendadas para aplicação em campo. Após a inoculação dos fungos, as placas foram incubadas em sala climatizada a 25±1°C, fotofase de 12h e umidade relativa de 70±10 por cento. Foram avaliados o diâmetro médio das colônias e o número de conídios produzidos após um período de incubação variável para cada fungo estudado. Os inseticidas tiametoxam e imidaclopride foram compatíveis com todos os fungos estudados. Por outro lado, óxido cuproso, iprodione, paratiom metílico, tebuconazole, metalaxil, mancozebe, folpete, fenpropatrina e tetraconazole inibiram o crescimento dos fungos, sendo classificados como produtos tóxicos ou muito tóxicos aos entomopatógenos.

Compatibility of entomopathogenic fungi with neonicotinoid insecticides / Compatibilidade de fungos entomopatogênicos com inseticidas nicotinóides

O efeito fungitóxico, in vitro, de três inseticidas neonicotinóides, acetamiprid (Saurus 200 PS), imidacloprid (Confidor 700 GrDA) e thiamethoxam (Actara 250 WG) em três concentrações (RM = recomendação média para campo, 0,7 RM e 1,3 RM), foi avaliado sobre os fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae e Paecilomyces sp. O efeito dos inseticidas sobre a germinação dos conídios, o crescimento vegetativo e a produção de conídios também foi avaliado. Os resultados mostraram que os produtos não afetaram a germinação dos conídios, com exceção do acetamiprid na maior concentração (1,3 RM) onde ocorreu uma inibição (Pú0,05) de M. anisopliae. O crescimento vegetativo foi inibido nos tratamentos acetamiprid, nas três concentrações, para B. bassiana e M. anisopliae. Também no tratamento thiamethoxam, na concentração RM e 1,3 RM o crescimento vegetativo foi inferior à testemunha para B. bassiana. Para Paecilomyces sp. o crescimento vegetativo foi superior ao da testemunha para os tratamentos 0,7 RM e RM de acetamiprid, todas as concentrações de imidacloprid e as duas menores de thiamethoxam. A produção de conídios foi menor para o tratamento de acetamiprid na maior concentração (1,3 RM) para os fungos Paecilomyces sp. e M. anisopliae e para imidacloprid na maior concentração (1,3 RM) para Paecilomyces sp. Já thiamethoxam inibiu a produção de conídios somente na menor concentração (0,7 RM) para M. anisopliae. Aumento de produção de conídios foi observado somente nos tratamentos acetamiprid nas duas menores concentrações (0,7 RM) e RM e thiamethoxam nas duas maiores (RM e 1,3 RM) para o fungo Paecilomyces sp. Assim, os inseticidas testados nas concentrações e formulações utilizadas mostraram, na maioria dos casos, compatibilidade com os entomopatógenos B. bassiana, M. anisopliae e Paecilomyces sp. Portanto, estes produtos poderão ser recomendados em programas de MIP, nas formulações e concentrações testadas, para o controle...

The in vitro fungitoxic effect of the neonicotinoid insecticides acetamiprid (Saurus 200 SP), imidacloprid (Confidor 700 WDGr) and thiamethoxam (Actara 250 WG) in three concentrations (AR= average field recommendation; 0.7 AR and 1.3 AR) to the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Paecilomyces sp. was studied. The effect of the insecticides on conidia germination, vegetative growth and conidiogenesis was compared. The insecticides had no effect on conidia germination, except under the highest concentration (1.3 AR) of acetamiprid, in which significant inhibition of M. anisopliae occurred. Vegetative growth of B. bassiana and M. anisopliae was significantly inhibited only by the three concentrations of acetamiprid treatment. Thiamethoxam treatment, in the AR and 1.3 AR concentrations, was significantly lower for B. bassiana vegetative growth. Paecilomyces sp. vegetative growth was higher than the control in the following treatments: 0.7 AR and AR of acetamiprid; all concentrations of imidacloprid; and in the two smallest concentrations, 0.7 AR and AR, of thiamethoxam. Conidia production was significantly smaller for Paecilomyces sp. and M. anisopliae, in the highest concentration (1.3 AR) of acetamiprid treatment and, for Paecilomyces sp., in the highest concentration (1.3 AR) of imidacloprid. Thiamethoxam significantly inhibited M. anisopliae conidia production, only in the smallest concentration (0.7 AR).Significant increase in the conidia production of Paecilomyces sp. fungus was observed in the following treatments: two concentrations, 0.7 AR and AR of acetamiprid; and in the two highest concentrations, AR and 1.3 AR, of thiamethoxam treatments. The use of insecticides, in the recommended formulations and other concentrations tested, in most cases, had no negative effect on conidia germination, conidia production and vegetative growth of B. bassiana, M. anisopliae and Paecilomyces sp. Consequently...